Analyse structurale du site actif de trois métallopeptidases à zinc : endopeptidase neutre-24. II, aminopeptidase N et enzyme de conversion de l'angiotensine
Armelle Hélène, B.. Roques, Philippe Ascher, Jean-Pierre Gorvel, Université Pierre et Marie Curie (Paris / 1971-2017). (Degree granting institution)
L'endopeptidase neutre, l'aminopeptidase n et l'enzyme de conversion de l'angiotensine sont trois metallopeptidases a zinc mammaliennes dont le séquençage a mis en évidence une homologie de séquence avec la thermolysine, endopeptidase à zinc bactérienne dont la structure tridimensionnelle et le mécanisme d'action sont connus grâce aux données de la cristallographie. Nous nous sommes intéressés à l'analogie d'organisation moléculaire du site actif de ces trois enzymes eucaryotes et de l'enzyme procaryote. Les modifications chimiques nous ont permis de montrer que le site actif de l'aminopeptidase n comporte des résidus fonctionnels caractéristiques des endopeptidases comme l'endopeptidase neutre et la thermolylysine mais également un carboxylate spécifique des aminopeptidases classiques. La mise en évidence d'une arginine analogue à celle de l'endopeptidase neutre dans le sous-site s'2 de l'enzyme de conversion de l'angiotensine permet d'expliquer la spécificité dipeptidylcarboxypeptidasique de ces deux enzymes, alors que la thermolysine qui ne possède pas un tel résidu est limitée à une action endopeptidasique sur ses substrats. Enfin, le marquage par photo affinité du site actif de l'endopeptidase neutre a permis de montrer que le sous-site s'1 responsable de sa spécificité pour les résidus hydrophobes est similaire à celui de la thermolysine et localise de façon analogue dans la séquence primaire des deux enzymes
Thesis, Dissertation, French, 1993